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細胞周期與細胞凋亡檢測試劑盒

簡要描述：產品概述 product description 貝博® BBcellProbe® 細胞周期檢測試劑盒是利用細胞內DNA能夠和熒光染料結合的特性，細胞各個時期其DNA含量不同從而結合的熒光染料不同，流式細胞儀檢測的熒光強度也不一樣來檢測細胞周期。 細胞周期（cell cycle)是指細胞從前一次分裂結束起到下一次分裂結束為止的活動過程，通常由G0/G1期、S期、G2期和M期組成。G1期：細胞開始RNA和蛋白質的合成，但DNA含量仍保持二倍體。S期：DNA開始合成，這時細胞核內DNA的含量介于G1期和G2期之間。當DNA復制結束成為4倍體時，細胞進入G2期。G2期的細胞繼續合成RNA及蛋白質，直到進入M期。因此，單純從DNA含量無法區分G2期和M期。一旦有絲分裂發生，細胞分裂成兩個細胞，這兩個細胞或者進入下一個細胞周期......

  • 產品型號：
  • 廠商性質：生產廠家
  • 更新時間：2025-07-30
  • 訪  問  量：96

詳細介紹

保存溫度
-20℃避光
注意事項
1.染液短期2周內可以2-8℃保存。染料長期不用可以-20℃保存。避免反復凍融。
2.試劑拆封后請盡快使用完！

有效期
1年
檢測方法
流式細胞儀
適用樣本
1.懸浮細胞 2.貼壁細胞
產品應用
流式細胞儀
儀器準備
1.流式細胞儀
2.離心機
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
試劑準備
1.PBS 緩沖液（pH7.4，實驗室常用的10mM磷酸緩沖鹽溶液（1X））
2.或者HBSS（Hank's Balanced Salt Solution）
耗材準備
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用注意事項
1.細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
2.使用含EDTA的細胞消化液。
3.洗滌細胞離心轉速不可超過800×g。
4.乙醇固定時離心大概采用2000×g力5分鐘，離心力太小可能部分細胞難以沉淀。? 5.固定時在振蕩器上輕輕振蕩細胞，并緩慢滴加75%乙醇，直接加入會導致細胞團聚的現象，很難重懸成單細胞。或者先用冷PBS懸浮細胞，充分懸浮，使細胞充分分散成單細胞。之后緩慢加入無水乙醇，終濃度為70-90%乙醇。乙醇固定之后須無細胞沉淀。


使用方法
1. 收集樣本細胞，細胞數量在1-5*106個。
2. 用冷PBS洗滌細胞兩次。
3. 在15ml離心管中，用500 μl PBS重懸細胞。
4. 慢慢滴加冷的無水乙醇或95%乙醇至終濃度為70%-80％冰凍乙醇。-20℃固定1小時或4℃固定過夜。
5. 在1000g離心10分鐘，棄上清，收集細胞。
6. 用冷PBS洗滌細胞一次。
7. 用500 μl冷PBS重懸細胞。
8. 加入Rnase A溶液20 μl， 37℃水浴30分鐘。
9. 400目篩網過濾。
10. 在1000g離心10分鐘，棄上清，收集細胞。
11. 加入400 μl PI染液重懸細胞，輕輕混勻后4℃避光孵育30分鐘-1小時。
12. 流式檢測結果。激發波長為488nm。采用適當分析軟件進行細胞DNA含量分析和光散射分析。
常見問題分析
1.染色后找不到細胞？
固定細胞可能難以離心沉淀；固定細胞可能成團；固定細胞膜容易損傷成碎片。操作過程中注意以上幾點。

2.可以不固定細胞嗎？
本試劑盒可以用于非固定細胞的周期檢測。
參考文獻
1.Meng Zhang, et al.
lnc9141-a and -b Play a Different Role in Bovine Myoblast Proliferation, Apoptosis, and Differentiation
Molecular Therapy-Nucleic Acids 2019 （IF=5.919）

2.Jiebing Yang, et al.
Phenylboronic acid-modified polyamidoamine-mediated delivery of short GC rich DNA for hepatocarcinoma gene therapy
Biomaterials science 2019 （IF=5.831）

3.Wenqi Chen, et al.
Chondroitin sulfate-functionalized polyamidoamine as a tumor-targeted carrier for miR-34a delivery
Acta Biomaterialia 2017 （IF=6.383）

4.Feng Liu, et al.
Interleukin-6-stimulated progranulin expression contributes to the malignancy of hepatocellular carcinoma cells by activating mTOR signaling
Sci Rep. 2016; 6: 21260 （IF 5.228）

5.Fei Fei, et al.
The number of polyploid giant cancer cells and epithelial-mesenchymal transition-related proteins are associated with invasion and metastasis in human breast cancer
Journal of Experimental & Clinical Cancer Research 2015 （IF 6.217）

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